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本产品可以从各种植物样本中提取总蛋白，提取过程简单方便。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高质量的蛋白提供了保证。

提取的蛋白用于双向电泳。如需要用于报告基因检测、SDS-PAGE电泳检测、Western blotting、凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活分析等下游实验的试剂盒，请选用我公司其他货号的试剂盒。

• 蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2～8℃保存，开盖使用后-20℃保存。
  
• 蛋白酶抑制剂在2～8℃低温时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。

• 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
  
• 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
  
• 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
  
• 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
  
• 本试剂盒提取的蛋白样本可直接用于2D电泳，也可根据需要进行TCA/丙酮沉淀处理后使用。

• 提取液的准备：
  根据所需要提取的样本量，每500μL蛋白提取液中A加入5μL试剂B和2μL蛋白酶抑制剂混合物，充分混匀后置冰上备用。
  注：
  ● 根据需要处理的样品数量准备蛋白提取液，蛋白酶抑制剂混合物不可一次全加入提取液。
  ● 加过蛋白酶抑制剂的提取液一周内未用完，再用前需再次加入蛋白酶抑制剂。
  ● 以下步骤中使用的蛋白提取液为此步配制好的含蛋白酶抑制剂的提取液。
  
• 取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的100～200mg植物组织样本用手术剪刀尽可能剪碎。
  
• 加入500μL提取液，充分混匀，用匀浆机/匀浆器充分匀浆或者置于研钵中用液氮研磨。
  注：
  ● 没有液氮研磨条件也可以直接加入提取液A研磨处理。
  ● 也可以采用现有的其他细胞破碎设备。
  
• 置振荡器上振荡20～40分钟。
  注：
  ● 使用振荡器/摇床的较低转速，提取液能轻微晃动即可。
  ● 没有振荡条件也可不振荡，稍微延长提取液的处理时间，中间每隔几分钟用移液器吹打混匀即可。
  
• 在12000×g条件下将提取液离心10分钟。
  
• 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到植物总蛋白。
  
• 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验或TCA/丙酮沉淀后进行下游实验。

• 蛋白浓度低？
  处理部分组织样本时可能没有裂解完全，导致蛋白浓度低。只要适当延长试剂A的处理时间即可。最好在持续振荡的条件下处理，没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。
  
• 用什么方法定量蛋白？
  建议用BCA法。不适合用Bradford法，因为试剂A中含有干扰Bradford法的组份，导致定量不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系，则可以用Bradford法定量。